人抵抗素(Resistin)ELISA KIT

1. 血清标本收集、处理、保存方法：

用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本，全血标本室温放置1－2 h或4℃隔夜，然后4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

2. 血浆标本收集、处理、保存方法：

根据样本要求选择EDTA或肝素钠或枸缘酸钠作为抗凝剂，用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本，室温混合20 min左右，然后4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清即为血浆。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

3. 细胞标本收集、处理、保存方法:

（1）细胞培养上清

 取细胞培养上清到干净离心管中，4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

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（2）细胞裂解液

收集细胞培养液，4℃、3000 rpm/min离心20 min，弃去上清，用预冷的PBS（0.01M，PH 7.4）洗涤三次。加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑制剂）重悬细胞。通过反复冻融，使细胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min离心20 min，除去细胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

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玻璃珠法：预先将适量的玻璃珠（根据采血量多少而定）清洗后，装入采血容器中，灭菌后备用。采血过程中，边采边摇采血瓶，以使小玻璃珠在血液中滚动，以机械地除去纤维蛋白，使血液不能凝固。本法虽较麻烦，但对淋巴细胞的活性影响zui小，且可减少血小板的混杂。

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