【产品介绍】

HAKATA无外泌体血清(Exosome-depleted)）是一款去除外泌体的特级血清产品。剔除率高达99%，同时保持了和处理前血清相同的良好的细胞生长及维持功能，能够满足几乎所有细胞的生长营养需求，包括各种肿瘤和转化细胞系、原代细胞、免疫细胞、部分干细胞（胚胎干细胞、间充质干细胞等）等。同时由于本血清中血红蛋白和内毒素含量水平都非常低，因此特别适合于培养对环境相对敏感和要求较高的细胞。适用于外泌体和细胞外囊泡、miRNA、细胞间通信等研究。

【产品特点】

1、内毒素含量低，三次纳米级过滤

2、严格控制批次差异

3、来源可靠、可溯源

4、每个批次均提供检验检疫报告

5、适合各种常规细胞培养

6、干冰运输，建议存储温度为-20℃至-10℃

HAKATA无外泌体血清主要作用

提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长 必须的物质。

提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素、类固 醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血 小板生长因子等。

提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪 、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。

提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。

对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋 白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的 的使用血清来终止yi蛋白酶的消化作用。因为yi蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传 代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时 ，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢解毒中起重要作用， 如SeO3,硒等 .

血清保存

血清应保存在-5。C至-2O。C。若存放于4。C 时，保质期减至一个月。若您一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内 ，再放回冷冻。

解冻血清

将血清从冷冻箱取出后，先置于2-8。C冰箱使之溶解，然后在室温下使 之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

注意事项：

1、解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2O。C至4。

C至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20。C至37。C)，实验显示非常容易产生沉淀物。

2、解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生.

3、请勿将血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。

4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

5、若必须做血清的热灭活，请遵守56。C，30分钟的原则，并且随时摇 晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。 [5]血清解冻后发 现有絮状沉淀物出现，该如何处理?　欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离 心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方 法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。

何谓热灭活?

一般是以56C，30分钟来处理已解冻的血清，因为此加热步骤，可以使补体去活化， 而补体所参与的反应有:溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增 强吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。

有必要做热灭活吗?

实验显示，经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理 过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或*没有任何作用，甚至通常因为高温处理影 响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显 著的增多，这些沉淀物在倒立显微镜下观察，像是 "小黑点"，常常会让研究者误以为是血 清遭受污染，而把血清放在37C环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。

HAKATA外泌体血清50ml

 胎牛血清（FBS）已在真核细胞培养中使用了几十年了。然而，很少有人关注FBS的RNA对培养的细胞会产生什么样的生物学效应。来自哈佛医学院的研究人员用RNA测序，证明了FBS含有蛋白质编码和调控的多种RNA，包括mRNA、miRNA、rRNA和snoRNA等。它们中的大多数（>70％）仍然存在于细胞外囊泡（EV）和细胞间通讯研究中常使用的长时间超速离心得到的无囊泡FBS（vesicle-depleted FBS, vdFBS）中。FBS相关的RNA会在分离细胞外膜泡RNA（exRNA）时一同被分离出来，这会对下游RNA分析造成干扰。许多进化上保守的FBS源的RNA种类会被错误地认为是人或小鼠细胞的转录本。

值得注意的是，在FBS中含量丰富的一些miRNAs，如miR-122、miR-451A和miR-1246，先前已被报道为在培养细胞来源的细胞外膜泡中富含的miRNAs，这可能是胎牛血清中miRNAs造成的假象。对公开可用的exRNA数据库的分析支持FBS污染的概念。此外，FBS转录本可被培养的细胞吸收，并影响高度敏感的基因表达谱技术的结果。因此，实验设计过程中采取减少FBS源RNA干扰的预防措施是非常有必要的。

大多数细胞培养时的需要在培养基中添加FBS，而FBS来源于胎牛血液，含有高丰度的牛外泌体。针对目的细胞分泌的外泌体研究时，这些牛外泌体可能会对结果产生显著的干扰，因此，需要通过无外泌体血清来解决此问题。

 细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后，细胞融合度约为60% - 70%时，移去原有含血清的培养基，换成新鲜的无外泌体血清培养基，继续培养48h左右，细胞融合度达到80%-95%左右时收取上清,该上清液即可用于提取外泌体。

无外泌体血清50ml

外泌体特指直径在30-100nm的盘状囊泡，其内部包裹了多种蛋白质、mRNA、non-coding RNA等分子。外泌体主要来源于细胞内多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。目前大量文献报道，几乎所有类型的细胞都可以产生并释放外泌体，不同的生物体液(血液、尿液、脑脊液、唾液、乳汁、腹水)中都发现有大量外泌体存在，外泌体由细胞分泌释放后，通过个种体液在体内传播，被靶细胞摄入后，释放内部的生物分子，参与细胞间的通讯，调节细胞功能。

*，细胞不断向细胞外空间分泌大量的小囊泡。这些小囊泡的直径大多为50-200 nm，脂双层结构，介导了细胞间的运输。至于运输了什么，人们没有太在意，大抵是一些不重要的蛋白吧。直到zui近，人们才发现他们错了。exosome及其他细胞外囊泡正起着*的细胞通讯作用。
   外泌体是包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm)。 所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。 有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物"和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。 外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，对外泌体的研究兴趣日益增长，无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。

无外泌体血清Exosome-free FBS，来自国外*胎牛血清，国内技术水平生产，*。外泌体（exosome）及其他细胞外囊泡（EV）一直是不起眼的灰姑娘，而zui近诊断和治疗潜力的发现，仿佛给这些小囊泡穿上了水晶鞋，使其一晃变成光彩夺目的公主。