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A172细胞人胶质母细胞瘤细胞
名称 A172细胞人胶质母细胞瘤细胞
型号 A172细胞
报价
特点 A172细胞人胶质母细胞瘤细胞  
1) 来源:传秋生物细胞库
2) 形态:贴壁上皮细胞样
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
6) 运输:顺丰发货}
  • 详细内容

 

A172细胞人胶质母细胞瘤细胞  

1) 来源:传秋生物细胞库

2) 形态:贴壁 上皮细胞样  

3) 含量:>1x106 个/mL

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

6) 运输:顺丰发货

培养条件:

培养基:DMEM+10% FBS(推荐HAKATA货号:HN-FBS-500)

温度:37℃     气相:95%空气,5%二氧化碳

传代

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液

2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:2到1:4

3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(diyi次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zuijia消化时间,记录zuijia消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。

冻存:

建议使用本公司无血清细胞冻存液货号:H-W-100,用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。

保存条件:液氮存储

温馨提示(常见问题,处理方式

T25瓶为例;

1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

 

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

 

注:diyi次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。

细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存

 

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A172细胞人胶质母细胞瘤细胞  

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