使用MEM培养基（推荐HAKATA货号A19512）；10%胎牛血清(推荐HAKATA货号：HN-FBS-500)；1%双抗（推荐HAKATA货号：H8611）

AOLEWIS

专注于细胞及系列产品的研发、生产和服务，并提供专业细胞技术服务外包的技术企业。公司主要研发生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、基础培养基、完培、辅助试剂等系列产品，提供细胞及培养配套产品一站式采购服务；细胞库储存细胞系1309余种，同时通过不间断引种细胞扩大丰富细胞种类；公司还提供人源、小鼠源细胞系的近期STR鉴定，其他种属细胞的种属鉴定服务，细胞标志物检测，污染检测等细胞相关实验服务。公司细胞业务覆盖国内各大高校生物实验室、生物研究机构及一些生物科研、诊断、制药公司，不断为广大科研工作者提供优质的产品和服务！

注意事项↓

悬浮细胞漂浮的处理方法

注意:瓶中运输培养基不能继续使用，请换用按照说明书培养条件新配制的完培来培养细胞。培养悬浮细胞建议用未经TC处理的培养瓶。

1.收到货发现有任何异常现象、污染、漏液、细胞漂浮等，请拍照记录，并及时联系我们销售人员或技术支持;

2.用 75% 酒精擦拭瓶身，封口膜可以不用撕去，将 T25 瓶置于培养箱中静置 2~4h 后进行操作;悬浮细胞请将培养瓶竖立在培养箱中静置。在此期间，请查看说明书以确定细胞属性;

3. 静置4h后，请将瓶内所有细胞收集至6个15ml的离心管110g(1000rpm)离心3min,将所有离心后的细胞沉淀收集到一个T25培养瓶内，平放10分钟，镜下观察细胞密度，拍照记录后放入培养箱中继续培养，第二天密度达到80%即可传代;

4.悬浮细胞传代方法:观察细胞无碎片无死细胞的情况下，建议直接加入新鲜完培直接分瓶即可。

贴壁细胞漂浮的处理方法

注意：部分细胞由于贴壁松散，会出现运输后漂浮，冬天气温低时也会出现细胞收缩漂浮，属于不可避免

因素，正确处理后均可以正常生长。

1 .将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管，离心收集细胞(1200rpm约250g-300g离心力，离心

3-5min)去除旧培养基;

2. 用PBS重悬细胞，将所有细胞收集到一个离心管中，再次离心(1200rpm约250g-300g离心

力，离心3-5min)去除PBS;

3 .加入1ml左右胰酶EDTA溶液，0.25%重悬细胞，混匀即可，建议震动离心管混匀，避免吹打细

胞，放入培养箱消化细胞，根据细胞特性决定消化时间(TM3、TM4、293 系列约1~2分钟);

注意：部分细胞不能使用胰酶消化，请注意查看细胞说明书;单颗漂浮的细胞不需要胰酶处理。

4. 消化好后，用移液枪轻轻吹打细胞悬液，使细胞团分散，迅速加入3-5ml含10%以上血清的培

养基混匀终止消化，离心(1200rpm 3min)去除胰酶;

5.加入5ml左右的细胞完培混匀，按比例接入无菌培养瓶中;

6. 显微镜下观察细胞是否成均匀分散的单颗细胞，若有3-5个成团的小细胞团可不用重新消化，使

之贴壁后待细胞生长稳定后再次传代消散细胞。

产品使用 仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。