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2017-05-17 浏览次数：1191

血清10099-141血清的溶解与保存

血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。

1、如果不用，先放置-80℃保存。

2、如果要用，可于4℃冰箱放置过夜，再在室温溶解。

3、溶解好的血清应立即分装，-80℃保存。

4、保存于-80℃的血清解冻时应先与4℃冰箱放置过夜再在室温溶解。切勿直接放在室温溶解。

细胞传代方法

根据细胞生长的恃点，传代方法有3种：

1．悬浮生长细胞传代

离心法传代：离心（1000转/分）去上清，沉淀物加新培养液后再混匀传代。

直接传代法：悬浮细胞沉淀在瓶壁时，将上清培养液去除l／2一2／3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。

2．半悬浮生长细胞传代（杂交瘤）

此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹

打法使细胞从瓶壁脱落下来，进行传代。

3．贴壁生长细胞传代

采用酶消化法传代。常用的消化液有0.25％的胰蛋白酶液。

细胞冷冻保存

细胞应生长良好，处于对数生长期，密度为80%左右。

2.注意冷冻保护剂之品质。DMSO质量要好，应无菌且无色。

3.冷冻保存之细胞浓度：一般成纤维细胞1~3x106cells/ml，悬浮细胞5~10x106cells/ml，上皮细胞2~5x106。

4.冻存液的配方是：60%无血清培养液30%血清10%DMSO

HAKATA10099-141胎牛血清