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技术文章 / article
胎牛血清如何规范化溶解
2017-07-05 浏览次数:1665
胎牛血清加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞、平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
胎牛血清经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或*没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
1、胎牛血清说明
1)将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱12-24小时左右使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
2)切勿将刚刚从-20℃冰箱里拿出来的血清直接放在水浴中,无论室温的水或者37℃的水,因为在水浴中血清迅速熔化,很大的温差(-20℃到37℃,温差为57℃)极其容易造成血清产生沉淀。
3)直接放65℃水浴中更是极其残忍的做法,是对血清的亵玩,对科学规则的粗暴践踏!
4)血清应该在-10℃以下保存。若一次无法用完一瓶,应该无菌分装,再冷冻保存。
2.血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
1)若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起培养。
2)我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。