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技术文章 / article
胎牛血清出现黑点原因分析及如何预防
2017-10-10 浏览次数：1612
胎牛血清细胞培养中出现黑点是污染吗?又该如何处理?
一旦您在胎牛血清细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。
如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：
1、细血清质量不好，反复冻融的结果;
2、配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;
3、配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长;
4、胞生长过老，破碎的细胞残骸;
5、培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。
胎牛血清细胞培养中如何防止黑点生成?
1、培养基保持*PH值7.0-7.2。
2、培养基无需37℃水浴。
3、尽可能地减少血清冻融次数。
4、严格控制配制培养基的水质，容器定期刷洗。
5、掌握细胞传代的*时机，细胞切勿生长过老。
一旦您在胎牛血清细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。
如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：
1、细血清质量不好，反复冻融的结果;
2、配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;
3、配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长;
4、胞生长过老，破碎的细胞残骸;
5、培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。
胎牛血清细胞培养中如何防止黑点生成?
1、培养基保持*PH值7.0-7.2。
2、培养基无需37℃水浴。
3、尽可能地减少血清冻融次数。
4、严格控制配制培养基的水质，容器定期刷洗。
5、掌握细胞传代的*时机，细胞切勿生长过老。
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