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技术文章 / article
解析10437-028胎牛血清做热灭活试验是否是必然的
2017-10-24 浏览次数:1314
为什么要热灭活10437-028胎牛血清?
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞、平滑肌细胞时,推荐使用热灭活10437-028胎牛血清。
热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质,在对补体灭活以外,还可去除血清中的支原体的污染。常规灭活建议的温度在45℃到62℃之间,而时间则从15分钟到60分钟不等,其中zui常用的就是56℃热处理30分钟。现在好像不主张热灭活,热灭活经常给血清产品带来负面影响,对血清的加热经常导致血清中沉淀的产生,此外,有研究结果证实热灭活步骤减弱了胎牛血清和小牛血清对细胞的促粘附作用。
10437-028胎牛血清热灭活处理步骤:
1、选用与血清瓶同规格的对照瓶一个。
2、对照瓶内放入与血清等体积的水。
3、温度预试
4、血清灭活:血清瓶与带温度计的对照瓶一齐放入水浴箱中,待温度计所示温度上升至56℃时,定时30分钟。
5、大瓶血清灭活后,进行分装,在-20到-70℃保存。
有必要做热灭活吗?
实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或*没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量!
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞、平滑肌细胞时,推荐使用热灭活10437-028胎牛血清。
热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质,在对补体灭活以外,还可去除血清中的支原体的污染。常规灭活建议的温度在45℃到62℃之间,而时间则从15分钟到60分钟不等,其中zui常用的就是56℃热处理30分钟。现在好像不主张热灭活,热灭活经常给血清产品带来负面影响,对血清的加热经常导致血清中沉淀的产生,此外,有研究结果证实热灭活步骤减弱了胎牛血清和小牛血清对细胞的促粘附作用。
10437-028胎牛血清热灭活处理步骤:
1、选用与血清瓶同规格的对照瓶一个。
2、对照瓶内放入与血清等体积的水。
3、温度预试
4、血清灭活:血清瓶与带温度计的对照瓶一齐放入水浴箱中,待温度计所示温度上升至56℃时,定时30分钟。
5、大瓶血清灭活后,进行分装,在-20到-70℃保存。
有必要做热灭活吗?
实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或*没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量!