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2019-08-30 浏览次数：2447

　　胎牛血清的制备流程非常严格，放心使用

　　1、血清来源：可从世界各国收集胎牛血清，但是必须符合他的质量标准。地方当局还不清楚本地是否有牛海绵状病毒流行的血清不收集，有说明血清质量的证明资料：包括收集过程的全部资料、检验结果和交付情况。

　　2、血清的收集：胎牛血清是心脏穿刺取血，新生牛(10～14天)和小牛(10个月内)血清静脉取血。血清采集条件必须符合工业生产的标准：低温下采集、一次分离、分离后立即混合冻存。符合要求的血清56℃水浴30分钟灭活。

　　3、血清的制备：

　　a. 超低IgG胎牛血清：通过亲和层析工艺去除胎牛血清中的γ球蛋白，使FBS γ球蛋白含量减到zui低，一般IgG≤5ug/ml，生物学活性不变。

　　b. 血清透析：用12000～14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧化酶/过氧化酶方法测定)。

　　c. γ-射线照射：已经证明γ-射线照射可以有效灭活血清中可能污染的病毒、支原体。照射剂量为30～45KG。而且这个剂量的γ-射线照射不会改变血清的理化性质和对细胞培养的影响。

　　4、除菌过滤:经过上述处理的粗制血清再经过一系列除菌滤膜过滤包括0.2微米(micron)和0.1微米滤膜。FBS要通过三层0.1微米滤膜，其他血清可通过0.2微米滤膜。

胎牛血清

　　成品血清质量检定

　　1)化学检定：渗透压pH

　　蛋白含量――电泳法

　　白蛋白球蛋白血红蛋白

　　随着牛年龄增加血清中总蛋白含量相应增加，总的血清蛋白含量可以确定产品规格和年龄。

　　2) 微生物学检查：细菌、真菌符合USP标准。

　　支原体：在支原体专业培养基上培养了3～4周，培养温度36℃±2℃

　　分别在需氧和厌氧条件下进行，有的还需要在支原体琼脂培养皿上传4次，Hoechst荧光素DNA染色检查那些培养法

　　无法检出的支原体如猪鼻支原体等。

　　3)内毒素检测

　　用鲎试剂检查。

　　4)细菌噬菌体检查

　　主要检查E.Coli(C300 or K-12)噬菌体。

　　5)激素含量测定

　　每批FBS对某些激素含量都要进行测定，包括：雌二醇、胰岛素、孕硐、睾wan素、甲状腺素等。

　　6)血红蛋白检测

　　血红蛋白与氧合血红蛋白的比≥70%，血红蛋白含量≤mg15/dl。

　　7)细胞生长效果测定

　　细胞克隆效果测定，细胞选择：Sp20/Ag-14 或P3X63-Ag8.653。