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技术文章 / article
DMEM细胞培养基常用的灭菌方法主要有湿热灭菌和过滤除菌
2021-10-27 浏览次数：2696
灭菌是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。
常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类：物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施。化学方法是使用升gong、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理等。
DMEM细胞培养基常用的灭菌方法主要是湿热灭菌和过滤除菌。
1、湿热灭菌：
蒸汽在冷凝时释放出大量潜能，并且蒸汽具有强大穿透力，蒸汽的湿热破坏菌体蛋白质和核酸的化学键，使酶失活，微生物因代谢障碍而死亡。湿热灭菌的效果，取决于致死温度和致死时间。致死温度是杀灭微生物的极限温度。致死时间是在致死温度下杀灭全部微生物所需时间。
高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基分装后应立即灭菌，应在当天内完成灭菌工作，不可过夜。消毒时间不宜过长，也不能超过规定的压力范围，否则有机物质就会在高温下分解，失去营养作用，也会使培养基变质、变色，甚至难以凝固。
2、过滤除菌：
一些抗生素及有机物等，遇热容易分解，不能与培养基一起进行高温灭菌，而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌，例如含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂培养基。过滤后的溶液要立即加入培养基中，若为液体培养基，可在培养基冷却至30℃时加入;若为固体培养基，必须在培养基凝固之前(50-60℃)加入，振荡使溶液与其他成分混合均匀。
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