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动物血清的正确热灭活方法

2022-09-28 浏览次数:679

动物血清的热灭活非常容易造成蛋白析出增多,若非必要,可以无需做此操作。若必须做动物血清的热灭活,请严格遵守以下步骤:

1、保证血清*融化状态,温度接近常温。

2、保证水浴温度56℃、30分钟的原则,在水浴过程中每隔2-3分钟摇晃瓶子,使血清内部受热均匀,直至灭活时间结束。

注意事项:

温度过高、时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多,甚至严重影响血清的品质。在56℃水浴中,持续恒温30分钟。在此过程中每隔2-3分钟摇晃瓶子,使其受热均匀,减少蛋白的析出。

为什么要热灭活血清?

加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。

实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是小黑点,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量!

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