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原代培养技术的注意事项

2023-12-08 浏览次数:673

一、注意污染

1、严格进行动物皮肤消毒,使用三套器械取材。新生动物皮肤先用2%碘酒液消毒,成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。

2、严格进行无菌操作,防止细菌、霉菌、支原体污染,避免化学物质污染。自取材开始,保持所有组织细胞处于无菌条件。细胞计数可在有菌环境中进行。

3、吸取液体前,瓶口和吸管进行火焰消毒;吸取液体时,避免瓶口和吸管碰撞。

4、离心管入台前,管口、管壁应消毒。

5、实验者离开超净台时,要随时用肘部关闭工作窗。

6、使用过的器械用酒精棉球擦去血污后,移入另一个器皿中继续消毒,在浸泡器械时剪刀口要叉开放,镊子弯头要向下放,并加盖消毒。凡在超净台外操作的步骤,各器皿需用盖子或橡皮塞,以防止细菌落入。

二、器材使用时既要注意用火焰消毒,又要防止烫伤、烫死细胞。经火焰消毒后的吸管一定要用Hanks液冷却。

三、超净台内温度、湿度较大,在夏天工作时台内散热更慢,因此进行细胞悬液混匀、接种时,离火焰要稍微远些,组织细胞、培养液等不能暴露过久,以免溶液蒸发。

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