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技术文章 / article
无外泌体血清用起来和普通血清有什么不同?
2026-09-16 浏览次数:23
养过细胞的人都知道,培养基里通常要加血清。血清提供营养、生长因子、附着因子,让细胞能贴壁、分裂、维持状态。但血清里有一个成分,这几年越来越引起注意——外泌体。外泌体是细胞分泌的小囊泡,携带着蛋白质、RNA、脂质,参与细胞间的信息传递。听起来是好东西,可放在某些实验里,它就成了干扰源。无外泌体血清,就是专门针对这个问题出现的。

血清里的外泌体,到底碍了什么事?
外泌体本身是生命活动的一部分,但在实验研究中,它常常扮演“不请自来”的角色。比如做外泌体相关研究,想看看某种细胞分泌了哪些外泌体、它们有什么功能。如果培养基里的血清自带一堆外泌体,测出来的信号到底是细胞分泌的,还是血清里本来就有的?这就说不清了。背景太高,实验组和对照组的差异就可能被淹没。
再比如,研究外泌体对细胞行为的影响。往培养体系里加外泌体,看细胞怎么反应。但如果基础培养基里的血清已经含有外泌体,它们也在持续影响细胞,实验的变量就不干净了。还有做miRNA、蛋白质组学分析的,血清外泌体带来的核酸和蛋白,会直接混入样本,干扰检测结果。
所以,做外泌体研究的人,通常需要一个“干净”的培养环境。无外泌体血清,就是把这个干扰源提前去掉的血清。
外泌体是怎么被“拿掉”的?
从血清中去除外泌体,不是一件随手就能做的事。外泌体尺寸很小,和血清里的其他成分混在一起,要分离它,得用几套不同的思路。
常见的方法之一是超速离心。血清在高的离心力下旋转,外泌体因为密度和尺寸的关系,会沉降到管底或某个密度层,上清液就是去除了外泌体的部分。这个方法比较经典,但操作耗时,离心力大,可能影响血清中某些蛋白的活性。
另一种是超滤。用特定孔径的滤膜,把小于孔径的分子滤过去,大于孔径的截留下来。外泌体尺寸通常在滤膜截留范围内,所以能被拦住。这个方法相对温和,速度快,但滤膜可能吸附一些血清成分,也可能因为孔径分布问题,去除不够好。
还有一种是亲和捕获或聚合物沉淀。利用外泌体表面的特定标志物,用抗体或亲和配体把它抓走;或者用聚合物把外泌体沉淀下来,再离心去除。这些方法各有各的针对性,也各有各的局限。
不同的处理方法,对血清本身的影响不同。有的可能让某些生长因子减少,有的可能改变血清的黏度或澄清度。所以,无外泌体血清不是简单“去掉一个东西”,而是在尽量保留血清支持细胞生长的能力的同时,把外泌体这个变量控制住。
用起来和普通血清有什么不同?
从操作上说,无外泌体血清和普通血清的用法差不多。解冻、分装、按比例加入培养基,步骤一样。但有几个地方值得留意。
解冻方式会影响血清质量。通常建议逐步解冻,避免温度剧烈变化导致蛋白沉淀。无外泌体血清因为经过处理,某些成分可能更敏感,解冻时更要注意。分装后避免反复冻融,这一点对任何血清都适用,对无外泌体血清尤其如此。
批次差异也需要关注。不同批次的血清,外泌体去除程度、生长因子含量、支持细胞生长的能力,都可能有些浮动。做长期实验的话,最好一次备足同一批次的血清,减少变量。
另外,无外泌体血清不等于“无血清”。它仍然含有血清的大部分营养成分,只是外泌体被去除了。它和化学成分明确的无血清培养基是两回事,不能混用概念。
它适合谁,不适合谁
做外泌体分离、鉴定、功能研究的人,通常需要它。做细胞外囊泡相关课题的,也常把它作为基础培养基的添加物。还有一些对培养体系背景要求高的实验,比如某些敏感的细胞因子检测、微RNA表达分析,也可能用到。
但如果只是常规细胞培养、不做外泌体相关分析,普通血清就够用了,没必要非用无外泌体的。它的处理成本更高,价格通常也更贵,用在不需要的场合就是浪费。
无外泌体血清的存在,反映的是研究精细化的趋势。过去养细胞,有血清就行;现在研究越做越细,连血清里自带的小囊泡都要考虑进去。它不是一个“更好”的血清,而是一个“更干净”的血清——为了把实验变量控制住,宁可多花一点成本,也要让背景更清晰。对于做外泌体研究的人来说,它提供的不是营养,而是一份可解释性。

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