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A2780/Taxol细胞- A2780/Taxol耐药株

2017-04-12 浏览次数:1150

人卵巢癌紫杉醇耐药株 A2780/TAXOL细胞功能判定 B细胞受抗原或丝裂原刺激活化后,可发生增殖,并分化为浆细胞合成和分泌各种免疫球蛋白(Ig)B细胞功能低下或缺陷,可表现为体内Ig和血型抗体量下降或缺乏,患者对外源性抗原刺激的免疫应答能力减弱或缺陷,仅产生低滴度甚至不能产生特异性抗体。因此,定量测定受试者血清中Ig的含量,有助于评价人卵巢癌紫杉醇耐药株 A2780/TAXOL细胞功能是否正常,也是诊断体液免疫缺陷的重要指标。以下简要介绍检测B细胞功能常用的体外试验方法。

(1)B细胞增殖(转化)试验:体外引起B 细胞活化、增殖的刺激物主要有美洲商陆(PWM)、富含SPA的金葡菌Cowan-1(简称SAC),细菌脂多糖(LPS,对小鼠B细胞)、抗IgM抗体及EB病毒等。试验方法与T细胞基本上相同。

(2)溶血空斑形成试验:溶血空斑形成试验是测定产生抗体的人卵巢癌紫杉醇耐药株 A2780/TAXOL细胞数量和功能的一种经典体外实验方法。操作原则是将经过绵羊红细胞(SRBC)免疫的小鼠脾脏(或家兔淋巴结)制成单个细胞悬液,与一定量的SRBC在温热的琼脂糖凝胶内混和均匀后,倾注于小平皿或玻片上成一薄层。置37℃温育一定时间。由于脾细胞中的抗体生成细胞释放抗SRBC抗体(溶血素),使其周围的SRBC致敏。在外加补体参与下,将SRBC裂解,从而在每个Ig分泌细胞即B细胞四周形成一个肉眼可见的溶血空斑。可用肉眼或放大镜观察计数,计算1×106个脾细胞中溶血空斑形成细胞(PFC)的数量。亦可采用定量溶血分光光度测定法(quantitative hemolysis spectrophotometry),又称B细胞介导红细胞溶血的定量分光光度法。此法是根据溶血空斑试验原理衍化而来,可用于测定由一定数量B细胞生成和分泌的抗体,在补体参与下裂解绵羊红细胞释放出的血红蛋白量(OD值表示),藉以判定人卵巢癌紫杉醇耐药株 A2780/TAXOL细胞功能。

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