小鼠原代泪道上皮细胞，499/株

特点：贴壁生长 上皮细胞样、不规则细胞样 基础培养基500ml；生长添加剂5ml；胎牛血清50ml；双抗5ml

特性：仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

优势：提供免疫荧光鉴定报告

贴壁细胞接收后的处理：

1. 收到细胞后 ，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-4h ，若发现培养瓶破损 、有液溢出及细胞有污染 ，请拍照后及时联系我们

2. 静置完成后 ，请在显微镜下确认细胞状态 ， 同时给刚收到的细胞拍照(10x ， 20x)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存 ，作为售后时收到时细胞状态的依据 。

3. 贴壁细胞:细胞在379C培养箱中放置2-3h ，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况 ，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况 。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下 ，可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收 ，重悬打入到原培养瓶中)加入新配制的培养基6-8mL ，放到细胞培养箱中继续培养 。若细胞生长密度达70%-80%以上 ，可以对细胞进行传代处理 。传代过程中 ，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收 。

备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞 ，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的培养基来培养细胞 。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。

细胞复苏

贴壁细胞的复苏 、传代 、冻存步骤

1. 贴壁细胞复苏:从液氮灌中或-80℃C冰箱中查找到需要复苏的细胞 ，水浴锅提前打开预热 37℃℃1)将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;

2.加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀 。

3.弃去上清液 ，培养基重悬细胞 。然后将细胞悬液加入含6-8m!培养基接种于T25 培养瓶中(或6cm 皿中) ，培养过夜 ，第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度 

4. 贴壁细胞传代:如果细胞密度达80%-90% ，即可进行传代培养

5.弃去培养上清 ，用不含钙 、镁离子的PBS 润洗细胞 1-2 次;

6.加 1-2mL 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中 ，置于 37°℃培养箱中消化2-3min ，然后在显微镜    下观察细胞消化情况 ，若细胞大部分变圆并脱落 ，迅速拿回操作台 ，轻敲几下培养瓶后 ，加5ml以上含10%血清的

培养基终止消化;3)轻轻吹打细胞 ，脱落后吸出至离心管中 ， 1000rpm离心3-5min ，弃去上清液 ，补加1-2mL培养基后吹匀;4)按 5-6mL/瓶补加培养基 ，将细胞悬液按 1:2到 1:3的比例分到新的含 6-8mL培养基的培

养皿中或者培养瓶中 。

7. (传代两个T25或者两个6cm的皿)

贴壁细胞冻存:

1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中 ，可使用血球计数板计数 ，来决定细胞的 冻存密度 。一般细胞的推荐冻存密度为1x10 6~1x107个活细胞/ml;

2.1000rpm离心3-5min ，去掉上清 。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1m(冻存液含1x10^6~1x107个活细 胞/ml分配到-个冻存管中将细胞分配到冻存管中 ，标注好名称 、代数 、 日期等信息;

1. 按冻存数量加入无血清冻存波后直接放-80℃冰箱过夜 ，后续可转入液氨罐中长期保存 。

细胞接收注意事项：

1：观察有无破损漏液情况 ，如有请拍照及时联系客服。

2 ：酒精消毒培养瓶表面后显微镜下观察细胞状态 ，观察拍照后不用打开培养瓶盖 ，放入培养箱静止2- 3小时稳定细胞状态。

3 ：请按照细胞操作指南进行第一次传代冻存处理。

4 ：产品随货会附带细胞说明书、细胞培养操作指南、STR 鉴定、支原体检测报告。

5 ：若产品有异常或其他疑问 ，可随时联系客服

6.收到后 ，培养条件(完培配置)需跟保持一致 ，如有变动销售另行告知

仅限于科学研究 ，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

小鼠原代泪道上皮细胞，499/株

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