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小鼠原代三叉神经星形胶质细胞,499/株
名称 小鼠原代三叉神经星形胶质细胞,499/株
型号
报价 499
特点 小鼠原代三叉神经星形胶质细胞,499/株;提取周期1周左右,提供支原体检测报告和免疫荧光鉴定,良好的售后支持,技术一对一辅导,确保养好。蒂科生物提供HAKATA 胎牛血清、拥有自己的细胞库,库存几千株细胞株细胞系、耐药株、永生化细胞、原代细胞等,另出售相关上下游试剂,欢迎咨询!}
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小鼠原代三叉神经星形胶质细胞,499/株;提取周期1周左右,提供支原体检测报告和免疫荧光鉴定,良好的售后支持,技术一对一辅导,确保养好。蒂科生物提供HAKATA 胎牛血清、拥有自己的细胞库,库存几千株细胞株细胞系、耐药株、永生化细胞、原代细胞等,另出售相关上下游试剂,欢迎咨询!

小鼠原代三叉神经星形胶质细胞(TGAs)属于中等偏难、对操作/纯度要求高的原代胶质细胞;比皮层星形胶质细胞难,但比原代神经元易、比膈肌细胞简单。

 

一、基本特性

 

• 来源:新生小鼠(P0–P3)三叉神经节/神经根,周围神经胶质,GFAP阳性。

 

• 形态:梭形/多角形、星形突起,贴壁牢,铺路石样成片。

 

• 纯度:原代含施万细胞、成纤维细胞、小胶质;纯化后GFAP+ ≥90%。

 

• 传代:最多3–4代;2–4代功能最稳,5代后老化/活化。

 

• 倍增:约48–72h,增殖偏慢。

二、培养难度(★★★★☆)

 

✅ 优点

 

• 贴壁强、不易漂,污染风险低。

 

• 专用培养基易维持形态,自发分化少。

 

⚠️ 核心难点

 

1. 取材极精细:三叉神经节小、埋得深,易带脑膜/血管/神经元杂质。

 

2. 杂细胞难除:施万细胞、成纤维细胞长得快,抢占营养。

 

3. 消化敏感:神经组织纤维多,胰酶+胶原酶联合消化,时间长死细胞多、短产量低。

 

4. 血清/包被要求高:需10%–15%优级FBS,多聚赖氨酸(PLL)包被,裸板贴壁差。

 

贴壁细胞接收后的处理:

 

1. 收到细胞后 ,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-4h ,若发现培养瓶破损 、有液溢出及细胞有污染 ,请拍照后及时联系我们

 

2. 静置完成后 ,请在显微镜下确认细胞状态 , 同时给刚收到的细胞拍照(10x , 20x)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存 ,作为售后时收到时细胞状态的依据 。

 

3. 贴壁细胞:细胞在379C培养箱中放置2-3h ,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况 ,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况 。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下 ,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收 ,重悬打入到原培养瓶中)加入新配制的wan quan培养基6-8mL ,放到细胞培养箱中继续培养 。若细胞生长密度达70%-80%以上 ,可以对细胞进行传代处理 。传代过程中 ,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收 。

 

备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞 ,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的wan quan培养基来培养细胞 。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。

 

细胞复苏

 

贴壁细胞的复苏 、传代 、冻存步骤

 

1. 贴壁细胞复苏:从液氮灌中或-80℃C冰箱中查找到需要复苏的细胞 ,水浴锅提前打开预热 37℃℃1)将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;

 

2.加入到含4-6mLwan quan培养基的离心管中混合均匀 。

 

3.弃去上清液 ,wan quan培养基重悬细胞 。然后将细胞悬液加入含6-8m!培养基接种于T25 培养瓶中(或6cm 皿中) ,培养guo ye ,第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度 。

 

4. 贴壁细胞传代:如果细胞密度达80%-90% ,即可进行传代培养

 

5.弃去培养上清 ,用不含钙 、镁离子的PBS 润洗细胞 1-2 次;

 

6.加 1-2mL 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中 ,置于 37°℃培养箱中消化2-3min ,然后在显微镜 下观察细胞消化情况 ,若细胞大部分变圆并脱落 ,迅速拿回操作台 ,轻敲几下培养瓶后 ,加5ml以上含10%血清的

 

培养基终止消化;3)轻轻吹打细胞 ,脱落后吸出至离心管中 , 1000rpm离心3-5min ,弃去上清液 ,补加1-2mL培养基后吹匀;4)按 5-6mL/瓶补加wan quan培养基 ,将细胞悬液按 1:2到 1:3的比例分到新的含 6-8mL培养基的培

 

养皿中或者培养瓶中

 

7. (传代两个T25或者两个6cm的皿)

 

贴壁细胞冻存:

 

1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中 ,可使用血球计数板计数 ,来决定细胞的 冻存密度 。一般细胞的推荐冻存密度为1x10 6~1x107个活细胞/ml;

 

2.1000rpm离心3-5min ,去掉上清 。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1m(冻存液含1x10^6~1x107个活细 胞/ml分配到-个冻存管中将细胞分配到冻存管中 ,标注好名称 、代数 、 日期等信息;

 

1. 按冻存数量加入无血清冻存波后直接放-80℃冰箱过夜 ,后续可转入液氨罐中长期保存 。

 

细胞接收注意事项:

 

1:观察有无破损漏液情况 ,如有请拍照及时联系客服。

 

2 :酒精消毒培养瓶表面后显微镜下观察细胞状态 ,观察拍照后不用打开培养瓶盖 ,放入培养箱静止2- 3小时稳定细胞状态。

 

3 :请按照细胞操作指南进行第一次传代冻存处理。

 

4 :产品随货会附带细胞说明书、细胞培养操作指南、STR 鉴定、支原体检测报告。

 

5 :若产品有异常或其他疑问 ,可随时联系客服

 

6.收到后 ,培养条件(完培配置)需跟保持一致 ,如有变动销售另行告知

 

仅限于科学研究 ,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

小鼠原代三叉神经星形胶质细胞,499/株 

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